HiFiTaq Polimeraza DNA 1000U, [5 U/?l]

HiFiTaq Polimeraza DNA jest specjalnie dobraną mieszaniną enzymów Pfu i Taq Polimeraz DNA, mającą na celu zwiększenie efektywności reakcji amplifikacji DNA. Polimeraza HiFiTaq uzyskuje maksymalną aktywność w temp. 70 ? 74 °C (może również pracować w stosunkowo niskich temperaturach tzn. od 25 °C). Czas półtrwania enzymu w temp. 94 °C wynosi w przybliżeniu 45 min.Enzym prowadzi syntezę DNA w kierunku 5? - -> 3? w obecności jonów Mg2+ oraz przy odpowiednim stężeniu dNTPs.

---

Enzym wykazuje niewielką aktywność egzonukleazy 3? - -> 5? tzw. "aktywność kontrolną? (proofreading activity). Aktywność egzonukleazy 3 ?--> 5? powoduje, że HiFiTaq Polimeraza DNA jest znacznie efektywniejsza w reakcjach amplifikacji DNA od zwykłej polimerazy Taq. W optymalnych warunkach amplifikacji polimeraza HiFiTaq wprowadza znacznie mniejszą ilość błędów, w porównaniu ze zwykłą polimerazą Taq. Produkt, otrzymany z jej wykorzystaniem, posiada na obu końcach nieznaczną ilość dodatkowo włączonej zasady (A). Pozwala to na efektywne klonowanie bez konieczności przeprowadzania dodatkowych etapów reakcji.

---

HiFiTaq Polimeraza DNA wykazuje również aktywność egzonukleazy 5? - -> 3? przejawiającą się wyłącznie podczas pracy na dsDNA. Aktywność 5? - -> 3? czyni enzym bardziej efektywnym w reakcjach amplifikacji DNA metodą Real -Time PCR.

Maksymalna długość produktu, który można otrzymać z wykorzystaniem HiFiTaq Polimerazy DNA wynosi ok. 10 - 12 kpz..

Ważna właściwość: HiFiTaq Polimeraza DNA nie jest enzymem, przeznaczonym dla wysokodokładnej syntezy DNA, jednakże dokładność syntezy przy użyciu tego enzymu jest ok. 6x wyższa w porównaniu z AllegroTaq Polimerazą DNA. W przypadku konieczności prowadzenia bardzo dokładnej syntezy proponujemy zastosowanie PrestoPfu Polimerazy DNA. Zalecana ilość polimerazy to 1u (0.2 ul) w końcowej objętości mieszaniny reakcyjnej 20 ul.

 

Klonowanie produktu otrzymanego w reakcji PCR przy użyciu HiFiTaq Polimerazy DNA: Ze względu na wysoką aktywność 3?-5? egzonukleazową zalecamy 12-16h czas inkubacji w temperaturze pokojowej RT przy klonowaniu produktu PCR przy użyciu popularnych wektorów np. pGEM T-easy.  

Przechowanie - 20 °C. Przewóz w specjalnych warunkach nie jest konieczny.

Bufor reakcyjny Mg2+ (10x): 700 mM Tris-HCl, pH 8.3 / 25 °C, 166 mM (NH4)2SO4, 25 mM MgCl2

Bufor do przechowywania (10x): 20 mM Tris-HCl pH 8.0, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% Nonidet P40TM, 0.5% TweenTM 20, 50% glicerol.

* Informujemy że w/w informacje mają charakter wyłącznie poglądowy i nie stanowią oferty w rozumieniu prawa handlowego i nie stanowią podstaw do porównania ofert w rozumieniu prawa o zamówieniach publicznych. Firma Novazym Polska zastrzega sobie prawo  do ich modyfikacji i zmiany. W celu otrzymania szczegółowej oferty i opisów dotyczących poszczególnych produktów prosimy o kontakt z naszym biurem.