Koszyk Twój koszyk jest pusty ...

Zaloguj się Załóż konto

Kategorie

Zmiana języka

Waluta

Producenci

Strona główna ? OFERTA DLA PARTNERÓW NAUKOWYCH ? PCR, RT_PCR, qPCR, LAMP, CPA ? PCR & Real Time PCR & Sondy molekularne & dNTPs ? Termofilne Polimerazy DNA ? Polimerazy Taq exo 5'-3' ? HybriDetect 2T, 100 pasków + modyfikowane startery (opcja)

PolecamyNasz hit

HybriDetect 2T, 100 pasków + modyfikowane startery (opcja)

Dostępność: Dostępność - 3 dni

Koszt wysyłki: od 135,00 zł Dostępne formy wysyłki dla oglądanego produktu:Odbiór osobisty - 0,00 zł
dla tego produktu koszt wysyłki jest ustalony indywidualnie - 135,00 zł

Stan magazynowy: 0 szt.

Stan produktu: Nowy

Zapytaj o produkt Poleć znajomemu Specyfikacja PDF

Opis produktu
Recenzje produktu (0)

HybriDetect 2T

Uniwersalne paski immunochromatograficzne do detekcji produktu reakcji PCR, LAMP lub analizy białek i innych produktów znakowanych FITC, biotyną lub digoksygeniną.

Charakterystyka produktu:

Analiza produktu reakcji w czasie 5 minut po jej zakończeniu.
Czułość analityczna pasków jest równoważna z elektroforezą agarozową i późniejszym barwieniem DNA przy użyciu EtBr.
czułość 5pg DNA (PCR).
Idealne do zastosowania jako metoda detekcji produktu uzyskanego w takich technikach molekularnych jak LAMP, RPA, CPA, PCR.
Dostępne w zestawie ze znakowanymi starterami reakcji PCR, LAMP, CPA, RPA (dostępne znakowania digoksygeniną, biotyną, FITC)

Przygotowanie próby do analizy:

UWAGA Wymagane jest wcześniejsze przygotowanie materiałów:

Przygotowanie roztworów (A i B). Każdy z roztworów musi zawierać w końcowym efekcie odpowiednio przygotowane i wyznakowany analit i detektor.

1) Solution A: konieczność znakowania produktu reakcji (np. starterów reakcji PCR, LAMP) przed detekcją

FITC (izotiocyjanian fluoresceiny)
Biotyna

2) Solution B: Konieczność znakowania produktu reakcji przed detekcją

FITC (izotiocyjanian fluoresceiny)
Digoksygenina

3) Do testu należy zastosować 100 ?L (materiału testowego lub przygotowanego zawierającego analit - solutions, A i B).

4) Załączony do testu bufor (MGCB2) może zostać użyty jako dedykowany do przygotowania rozcieńczania, roztworów zawierających analit, detektor.

Przykład użycia: Do 20 ?l materiału analizowanego należy dodać 80 ?l roztworu dla badanego analitu, czas inkubacji 5 min.

UWAGA: Objętość roztworu specyficznego dla analitu i czas inkubacji powinien zostać dobrany indywidualnie na etapie przygotowania metody. Ogólna procedurę przygotowania dla reakcji PCR została poniżej dokładnie opisana. Produkt reakcji PCR powinien zostać wyznakowany biotyną a specyficzna sonda powinna zostać wyznakowana FITC. Produkt stanowiący kontrolę wewnętrzną reakcji należy wyznakować digokosygeniną, a specyficzna dla niego sondę należy wyznakować FITC. W celu uzyskania produktu reakcji można użyć następujących technik molekularnych - RPA, CPA, LAMP, PCR.

Opis metody:

HybriDetect 2T jest gotowym do użycia uniwersalnym paskiem bazującym na technice immunochromatograficznej i przeciwciałach znakowanych koloidalnym złotem. Pasek został wytworzony do bardzo szybkiej jakościowej i ilościowej oceny produktów reakcji. Pozwala na ocenę takich analitów jak białka, przeciwciała lub produktów amplifikacji genów. Umożliwia wprowadzenie kontroli reakcji.

W ramach przygotowania do detekcji produktu użytkownik powinien zoptymalizować dwa systemy zawierające specyficzne:

Solution A: Zawierający pierwszy detector (przeciwciało, antigen, specyficzną sondę) znakowane FITC i drugi (przeciwciało, antygen, specyficzną sondę) znakowaną biotyną

Solution B: Zawierający (przeciwciało, antigen, specyficzną sondę) znakowaną FITC i drugi (przeciwciało starter) znakowane digoksygeniną.

Próbka podlegająca ocenie należy zmieszać z roztworem specyficznym dla analitu następnie użyć paska do detekcji analizowanego produktu.

Kompleks Analit (A) ? wyznakowany FITC i biotyną wiąże się jako pierwszy w strefie przeznaczonej na nakładanie próby na pasku z przeciwciałami znakowanymi koloidalnym złotem dla próby. Drugi kompleks podobnie jak pierwszy wiąże się również z przeciwciałami anty-FITC, następnie oba kompleksy A i B dyfundują w górę membrany paska poprzez odziaływania kapilarne. Cząsteczki złota zawierające specyficzny analit zatrzymają się w miejscu na pasku odpowiadającym za pojawianie się specyficznego prążka i kontroli reakcji (test band A- analyt A, test band B- analyt B). Nie związane cząsteczki koloidalnego złota zostaną immobilizowane w strefie przeciwciał specyficznych gatunkowo w celu uzyskania prążka kontroli paska do detekcji.

Zasada działania testu:

Strefa kontroli paska - control band dipstick

UWAGA! W każdym przypadku w tej strefie powinien pojawić się kontrolny pasek!
Pojawianie się widocznego paska kontroli świadczy o prawidłowym działaniu paska, nie należy w żadnym wypadku mylić go z paskiem kontroli reakcji wykrywającej specyficzny analit.

Interpretacja wyników otrzymanych przy użyciu paska:

Możliwe jest pojawianie się 3 typów wyników:

alt

Analiza produktów reakcji PCR

W pierwszym etapie należy dokładnie opisać pasek w zaznaczonym miejscu.

Dla każdej analizowanej próbki odpipetować 100 ?L HybriDetect Assay Buffer (lub specjalnie przygotowany dla próby) do dołka mikropłytki.
Nanieść 5-10 ul produktu reakcji po hybrydyzacji na przestrzeń paska przeznaczoną dla aplikacji próby.
Alternatywnie można pobrać 5-10ul produktu po hybrydyzacji bezpośrednio do roztworu reakcyjnego do dołka/probówki.
Umieścić pasek częścią aplikacyjną w roztworze następnie inkubować 5-15 minut.
Zinterpretować wynik

UWAGA:

Czułość metody detekcji jest wprost proporcjonalna do objętości analizowanej próbki PCR
Objętość roztworu analitu i czas inkubacji podlegają indywidualnej optymalizacji w metodzie detekcji.

Interpretacja wyniku reakcji PCR

Zastosowanie kontroli wewnętrznej reakcji PCR:

amplicon A ? znakowanie biotyną jest przeznaczony do detekcji właściwego produktu reakcji,
amplicon B znakowany digoksygeniną jest przeznaczony jako kontrola reakcji PCR.
alt

Linia testowa A	Linia testowa B	Kontrola paska	Interpretacja
widoczna	widoczna	widoczna	Linka kontroli widoczna test wykonano prawidłowo amplicon A jest wykryty (pozytywny wynik ) kontrola wewnetrzna reakcji PCR jest pozytywna (amplicon B)
niewidoczna	widoczna	widoczna	Linka kontroli widoczna test wykonano prawidłowo amplicon A nie został wykryty (test jest negatywny) kontrola wewnetrzna reakcji PCR jest pozytywna (amplicon B)
widoczna	niewidoczna	niewidoczna	wynik jest nieważny ponieważ linia kontroli paska nie pojawiła się
niewidoczna	widoczna
niewidoczna	niewidoczna
niewidoczna	niewidoczna	niewidoczna	test działa poprawnie linia kontroli testu pojawiła się reakcja PCR nie została wykonana prawidłowo (amplicon B nie został wykryty)
widoczna	niewidoczna	niewidoczna

Trouble Shooting "PCR"

Problem	Możliwy powód	Zalecenia
Niewidoczna linia kontroli paska	a) niedostateczna amplifikacja DNA b) przekroczona data ważności c) złe warunki przechowywania pasków	Przygotować nowe roztwory
Negatywny wynik detekcji za pomoca paska a widoczny prążek DNA na żelu	a) niespecyficzny produkt reakcji b) brak właściwej hybrydyzacji	Sprawdzić product PCR w technic Southern blotting lub poprzez sekwencjonowanie Sprawdzić warunki hybrydyzacji.
Olej mineralny	a) olej minaralny wpływa na detekcję za pomocą pasków b) reakcja może ulec inhibicji	Pobrać uważnie product PCR wyłącznie z dna probówki

Czułość oznaczenia reakcji "PCR"

Czułość analityczna pasków jest równoważna z elektroforezą agarozową i późniejszym barwieniem DNA przy użyciu EtBr. Niezależnie od wielkości produktu i ilości cykli PCR czułość metody wynosi 5pg DNA.

Przechowywać w temp. 2 ? 8° C w oryginalnym opakowaniu.
Przed zastosowaniem doprowadzić do temp. (18 - 28° C).
Należy przed zastosowaniem sprawdzić date przydatności do użycia. .
Chronić przed wilgocią.
Nie należy dotykać, znakować strefy paska nie pokrytej folia zabezpieczającą (labeling area).
The disposal of waste materials must be carried out according to current local regulations.
Nie należy dopuścić do kontaktu buforów ze skórą i śluzówkami.

Materiały w zestawie:

Komponent	Cat.-No.	zawartość	Przygotowanie	Przechowywanie	Data ważności
HybriDetect 2T paski: pokryte biotyną-ligand i przeciwciałami II rz. (goat) digoxigenine; poliklonalne (królicze) anti-FITC przeciwciała znakowane koloidalnym złotem	MGDS2	2 x 50 testu (niebieska laminacja)	Gotowy do zastosowania	2 - 8°; chronić przed wilgocią!	Jak na opakowaniu
HybriDetect 2T Assay Buffer: TBS	MGCB2	2 probówki 10 mL (yellow cap)	Ready-to use	2 - 8°C	Jak na opakowaniu

Wymagane Materiały:

Pipety
Końcówki do pipet z filtrem

Płytka 96-well microtiter plate

Literatura

Kiatpathomchai W, et al, J Virol Methods (2008); 153: 214-217
Puthawibool T, et al, J Virol Methods (2009); 156 (1-2): 27-31
Jaroenram W, et al, Mol Cell Probes (2009); 23 (2): 65-70
Nimitphak T, et al, Mol Cell Probes (2009); 24 (1): 1-5
Kikuchi T, et al, Nematology (2009); 99 (12): 1365-1369
Piepenburg O, et al, PloS Biology 2006, Volume 4, Issue 7, e204

Producent: Milenia Biotec
Dystrybutor: NOVAZYM POLSKA s.c.
Poznan Science &Technology Park
Rubież 46H Street,
61-612 Poznań,
POLAND
Tel + 48 61 610 39 10
Fax + 48 61 610 39 11
email: info@novazym.pl

Nikt jeszcze nie napisał recenzji do tego produktu. Bądź pierwszy i napisz recenzję.

Napisz recenzję

Pozostałe produkty z kategorii