Ampli-LAMP Reticuloendotheliosis (REV) Reagent Set 96 rxn

Dostępność: Dostępny

Czas wysyłki: 3 dni

Numer katalogowy: REV-001

Stan magazynowy: 100 szt.

Zapytaj o produkt Poleć znajomemu Specyfikacja PDF

Opis produktu
REV RT-LAMP - zasada działania testu
REV RT-LAMP - warunki temperatury i czasu reakcji
REV RT-LAMP - przygotowanie reakcji
REV RT-LAMP - zalecana izolacja RNA
Do pobrania (4)
Recenzje produktu (0)

Ampli-LAMP Reticuloendotheliosis (REV) Reagent Set 96 rxn

Opis jednostki chorobowej:

Wirus retikloendoteliozy, czyli ostrego nowotworu komórek siateczki (ang. Reticuloendotheliosis virus, REV) należy do wirusów RNA z rodziny Gammaretroviridae liczącej wiele szczepów wirusów, w tym wirusa REV z defektem genetycznym (REV-T), bez defektu (REV-A), syncytialny wirus oddechowy kurczaków (ang. chick syncytial virus, CSV), i wirusa martwicy śledziony (ang. spleen necrosis virus, SNV) (Witter and Fadly, 2003).

Uważa się, że wirus REV jest odpowiedzialny za choroby immunosupresyjne i runting disease u wielu gatunków ptaków, jak: kur, indyków, kaczek, gęsi, bażantów, pawi i innych (Bohls et al., 2006; Witter and Fadly, 2003).

Wirus łatwo integruje z genomem gospodarza i wiąże się z onkogenezą układu hematopoetycznego. Transpozycja regionów długich powtórzeń końcowych (ang. long terminal repeat, LTR) wirusa może zachodzić w obrębie odcinków MDV (ang. Marek's Disease Virus) i FPV (ang. Fowl Pox Virus) w genomie (Hertig et al., 1997; Isfort et al., 1992; Jones et al., 1996; Kost et al., 1993; Witter et al., 1997).

W związku z potencjałem chorobotwórczym wirus retikuloendoteliozy może być poważnym zagrożeniem dla przemysłu drobiowego. Zestaw odczynników pozwala w bardzo prosty i szybki sposób zidentyfikować wirusa REV z tkanek zainfekowanych kurczaków, zaś dzięki wiarygodnym wynikom może zapewnić monitoring wirusowej epidemii i określać stopień jej zaawansowania.

Prezentowany zestaw Ampli-LAMP jest dedykowany do analizy jakościowej wirusa retikuloendoteliozy. Nadaje się do pracy z większością aparatów do Real-Time PCR wyposażonych w bloki grzejne oraz kanał odczytu poziomu fluorescencji (kanał FAM), podobnie jak z urządzeniami Genie? II i Genie? III.

Zestaw zawiera:

Isothermal Master Mix (reaction buffer, MgCl₂, dNTPs, pyrophosphatase, GspSSD polymerase, fluorescent dye ? 6-FAM derivative).
Primers (mix, F3, B3, FIP, BIP, LF, LB each in 10 ?M concentration)
Reverse Transcriptase for Lamp reaction
Random primers

alt
1. Krzywa amplifikacji produktu LAMP w identyfikacji wirusa REV (próba pobrana z wątroby). Jeden cykl reakcji odpowiada 30 sek. amplifikacji w procesie izotermicznym. (1) PTC, (2) próba badana, (3) - NTC
alt
2. Krzywa topnienia produktu LAMP w identyfikacji wirusa REV. alt
3. Krzywa topnienia produktu LAMP. Temperatura topnienia dla właściwego produktu reakcji wynosi 87^oC.

Test opiera się na reakcji odwrotnej transkrypcji połączonej z amplifikacją w warunkach stałej temperatury (ang. Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification, RT-LAMP), gwarantuje bardzo szybką i wysoko specyficzną identyfikację materiału genetycznego wirusa REV powodującego retikuloendoteliozę u drobiu. Badany materiał zawierający RNA pozyskiwany jest z badanej tkanki. Wysoka czułość testu RT-LAMP REV zapewnia wykrycie już 0,1 pg wirusowego RNA w próbie. Wymagany czas reakcji przy użyciu standardowego termocyklera to ok. 40 minut, natomiast w przypadku aparatów qPCR lub platform Genie? II i Genie? III jest to ok. 30 minut. Test opierający się na reakcji RT-LAMP zachodzi dwa razy szybciej w porównaniu do standardowej amplifikacji PCR.

RT-LAMP REV reaction conditions:

REAL-TIME PCR
Stage	Temperature	Time	Cycles number
Reverse transcription	45 °C	30 min	1
Amplification	60 °C	30 sec	99
		Fluorescence measurement of amplification product after each reaction cycle i real-time
Product melting	65 ? 95 °C	0,5 °C / 5 sec
		Fluorescence measurement after each 0.5 °C temperature change.

Reagent	Volume / 1 rxn
RT-LAMP REV Isothermal Master Mix	15 ?l
RT-LAMP REV Primer F3/B3 10 ?M ? 0,5 ?l Primer FIP/BIP 10 ?M ? 2 ?l Primer LF/LB 10 ?M ? 1 ?l	7 ?l
Super Verte MMLV	1 ?l
Random primers	1 ?l
RT-LAMP REV Positive Control / RNA matrix	1 ?l
Total:	25 ?l

Protokół izolacji RNA z kart FTA:

Nikt jeszcze nie napisał recenzji do tego produktu. Bądź pierwszy i napisz recenzję.

Napisz recenzję

Pozostałe produkty z kategorii