DIFAST (APA buffer)

• DF1000-01 (100 preps)
• SDF Sample

• 10 mg tkanki do homogenizacji
• w przypadku izolacji z zawiesiny bakteryjnej z medium hodowlanym lub zawiesiny komórek pobrać 1mL ? 1,5mL zawiesiny płynnej. (UWAGA! Zawiesina komórek powinna być możliwie jednorodna nie zawierać cząstek stałych ? homogenna).
  Medium zawierające komórki lub bakterie należy odwirować w stożkowych probówkach 10 000  - 12 000g,  5 minut. Supernatant odrzucić przy pomocy 1000ul końcówki (nie przez dekantacje!).
  W przypadku izolacji DNA z kolonii bakteryjnych przenieść  4-5 kolonii bezpośrednio do wcześniej przygotowanej probówki z 250ul DIFAST (w tym przypadku należy kontynuować procedurę od etapu homogenizacji). 
• Do przygotowanego materiału dodać 250 ?l buforu DIFAST, następnie dokładnie resuspendować próbkę w buforze przy użyciu pipety z końcówką z filtrem o objętości 1000ul. Unikać formowania bąbli powietrza i areozoli.
   

Homogenizacja:

• Inkubować próby w 100oC przez 15 min w temp 1000C +/- 30C. :
• Po inkubacji próby dokładnie zworteksować następnie zwirować probówki 10 000- 12 000 g przez 5 min. Przenieść supernatant do nowych probówek osad odrzucić.
   

Przechowywanie:
Wyekstrahowany DNA może być bezpośrednio użyty do PCR/qPCR. Możliwe jest przechowywanie DNA po izolacji w temp +40C +80C. Długotrwałe przechowywanie DNA jest możliwe w temperaturze -180C ? 200C. Po długotrwałym przechowywaniu w niskiej temperaturze należy preinkubować izolaty w temp. 1000C +/- 30C przed ponownym użyciem w reakcji PCR/qPCR.
 
UWAGA! Pewne składniki buforów mogą działać silnie drażniąco. Podczas pracy ze wszystkimi związkami chemicznymi należy przestrzegać ogólnie obowiązujących przepisów BHP.
Ograniczenia w zastosowaniu: Ten produkt został zaprojektowany i wykonany wyłącznie do celów badawczych. Nie został przetestowany w kierunku zastosowania do celów diagnostycznych i do bezpośredniej produkcji leków oraz do celów związanych z produkcją leków.