LAMP (Loop-mediated Isothermal AMPlification) & CPA (Cross Priming Amplification)

 Lamp (Loop Mediated Isothermal AMPlification)

Technika molekularna umożliwiająca szybką amplifikację fragmentów DNA i RNA w  warunkach izotermicznych (w stałej temperaturze), która:

• umożliwia wysoko wydajną i wysoce specyficzną amplifikację dzięki zastosowaniu dwóch lub trzech par starterów komplementarnych do odpowiednich 6 lub 8 niezależnych miejsc na matrycy DNA

• pozwala na szybką identyfikację patogenów ludzkich, zwierzęcych i roślinnych ? czas detekcji wynosi od 5 minut do 1  godziny (10^9 kopii   DNA w czasie krótszym niż 30 minut)

• Charakteryzuje się wysoka odpornością  na zanieczyszczenia reakcji.

• polimerazy wykorzystywane w reakcji lamp wykazują aktywność zamiany nici (ang. strand displacement activity), co  eliminuje konieczność denaturacji matrycy; enzymy w zależności od pochodzenia wykazują aktywność odwrotnej  transkryptazy, co umożliwia wykonanie reakcji odwrotnej transkrypcji i amplifikacji w jednej probówce;

• produkty LAMP są różnej wielkości konkatamerami, złożonymi z wielokrotnych powtórzeń sekwencji matrycowej i  tworzą struktury typu łodyga-pętla (ang. stem-loop); 

• pozwala na monitorowanie ilości produktu reakcji w czasie rzeczywistym, co eliminuje etap szacowania ilości produktu  po zakończeniu reakcji;

• ? ?amplifikacja i detekcja odbywa się w jednej probówce (ang. close-tube system), co minimalizuje ryzyko kontaminacji    wynik reakcji może być obserwowany ?gołym okiem?, zarówno z jak i bez dodatku barwnika fluorescencyjnego.